Choisissez la méthode microbiologique rapide adaptée à vos besoins
Les méthodes rapides de microbiologie (RMM) connaissent un succès croissant dans les secteurs de la pharmacie, des biotechnologies, des produits d'entretien et d'hygiène personnelle, ainsi que de la cosmétique. En combinant ce BioPhorum et notre expérience dans l'accompagnement de laboratoires issus d'une grande variété de secteurs, nous avons élaboré ce guide étape par étape pour vous aider à choisir la meilleure méthode rapide de microbiologie pour votre laboratoire.
Les services de contrôle qualité en microbiologie doivent identifier les facteurs clés et les exigences les plus importants pour leur flux de travail et leur activité. Des exigences telles que la compatibilité des échantillons, l'expertise du fournisseur et la facilité de mise en œuvre peuvent varier d'un site à l'autre ou d'une organisation à l'autre.
Découvrez les solutions disponibles sur le marché →
- Identifiez les méthodes de test rapide de microbiologie disponibles
- Déterminez celles qui sont compatibles avec vos objectifs et vos processus de fabrication
- Peuvent-elles être utilisées pour tester à la fois des produits stériles et non stériles ?
Comparer les technologies →
- Comparez leurs forces et leurs faiblesses
- Sont-elles qualitatives ou quantitatives ?
- Quelle est la technologie de détection qu'elles utilisent ?
Élaborer une analyse de rentabilité →
- Présenter vos conclusions aux principaux décideurs
- Utilisez notre outil d'évaluation de l'impact financier pour étayer votre dossier en exposant les raisons de votre choix ainsi que les risques, les coûts et et le retour sur investissement
Planifiez votre stratégie de validation →
- Rassemblez les informations nécessaires à la mise en œuvre réussie de la technologie choisie
- Prenez contact avec les organismes de réglementation, si possible
- N'oubliez pas que pour que les RMM soient approuvés pour les tests de routine, ils doivent d'abord être validés
La dernière étape consiste à déployer l'utilisation de la RMM à l'échelle mondiale dans tous les sites de production de votre organisation. Bien que cela puisse sembler une tâche colossale, nous avons constaté des implémentations réussies chez des leaders du secteur, tant sur le marché des produits stériles que sur celui des produits non stériles. Alors que l'adoption des méthodes de détection microbienne rapide ne cesse de croître, il est plus important que jamais que les fournisseurs ne se contentent pas d'être de simples fournisseurs d'instruments, mais qu'ils deviennent des partenaires tout au long du processus. Grâce à ses instruments automatisés à haute capacité, Celsis est spécialement conçu pour offrir une flexibilité de test et optimiser l'efficacité de votre laboratoire.
- Facteurs déterminants et cadre de mise en œuvre
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Méthodes rapides de microbiologie: éléments clés à prendre en compte
- Éléments à prendre en compte lors du choix d'une méthode rapide
- Comparaison des technologies ARMM
- Matrice des produits RMM
- Technologies qualitatives
Bioluminescence ATP
Bioluminescence ATP utilise une réaction naturelle qui se produit en présence d'adénosine triphosphate (ATP), lorsque l'enzyme luciférase transforme la luciférine en oxyluciférine. Comme l'ATP est présent dans toutes les cellules vivantes bactériennes, fongiques et de levure, et que cette réaction ne se produit qu'en présence d'ATP, cela permet de détecter une contamination microbiologique dans un échantillon. La lumière produite par cette réaction est automatiquement détectée par les luminomètres Celsis. Il s'agit également de la réaction qui donne aux lucioles leur célèbre lueur.
Surveillance du CO2
La surveillance du CO2 consiste en la mesure qualitative de l'augmentation des niveaux de CO2, qui sert d'indicateur de la croissance microbienne à l'intérieur d'un flacon fermé. La variation des niveaux de CO2 à l'intérieur du flacon fermé entraîne une modification du pH du flacon, ce qui change la couleur d'un indicateur sur le flacon contenant l'échantillon. Un instrument mesure le changement de cet indicateur, qui se traduit par une baisse du pH, afin de signaler la présence éventuelle d'une contamination.
Détection sélective par PCR
Dans la détection sélective par PCR, les bactéries sont détectées en ciblant des régions conservées spécifiques des génomes bactériens ou fongiques/de levures. La région codante de l'ARNr 16S pour les bactéries et celle de l'ARNs 18S pour les champignons/levures sont amplifiées par PCR. Les fragments amplifiés sont ensuite détectés pour indiquer la présence d'une contamination. Cette technologie est souvent utilisée spécifiquement pour les mycoplasmes, car ceux-ci ne sont pas détectés par les méthodes traditionnelles destinées aux bactéries, aux levures et aux moisissures. Ce test peut être très sensible ; cependant, il nécessite une préparation manuelle considérable avec des paramètres de protocole expérimental très stricts. - Technologies quantitatives
Détection par cytométrie
La détection par cytométrie en flux est généralement utilisée pour la mesure des cellules. La cytométrie en flux est réalisée en concentrant les cellules en un flux étroit, ou « file indienne », dans un fluide dans une tubulure. Des photomultiplicateurs détectent la diffusion de la lumière et la fluorescence, ce qui fournit des informations sur la taille et la morphologie de la cellule. La cytométrie en phase solide est similaire, sauf que l'échantillon est d'abord filtré à travers une membrane. Les micro-organismes qui restent sur le filtre sont marqués avec un fluorophore, puis balayés par le laser afin de détecter non seulement les micro-organismes, mais aussi les particules fluorescentes.
Dénombrement assisté par fluorescence
Le dénombrement assisté par fluorescence est une technologie d'imagerie qui consiste à compter visuellement les colonies marquées par fluorescence sur une membrane. À l'instar de la cytométrie en phase solide, les micro-organismes capturés sur un filtre sont directement marqués avec un substrat non fluorescent qui est clivé par les micro-organismes vivants et absorbé par la cellule. Seules les cellules vivantes émettent une fluorescence, mais ces technologies nécessitent toujours qu'un utilisateur effectue le comptage. Ces systèmes sont généralement capables de détecter des microcolonies, composées de plusieurs cellules ou d'unités formant des colonies, et peuvent avoir des difficultés à détecter des cellules individuelles.
Compteurs de colonies automatisés : dénombrement assisté par autofluorescence
Les compteurs de colonies basés sur l'autofluorescence sont des technologies d'imagerie qui exploitent la fluorescence naturelle produite lorsque des colonies de micro-organismes sont exposées à une lumière d'une longueur d'onde spécifique. Dans ces systèmes, les échantillons mis en culture sont exposés à une lumière puissante de longueur d'onde étroite ; leur autofluorescence momentanée est capturée sous forme de données par un dispositif à couplage de charge (CCD). Une image est générée à partir de ces données. Les images obtenues sont soit examinées manuellement pour déterminer s'il y a contamination sous forme de colonies luminescentes, soit un algorithme est utilisé pour identifier les colonies par rapport à l'arrière-plan grâce au rapport signal/bruit. L'un des inconvénients de ces instruments est que l'exposition répétée à cette lumière de forte intensité génère de la chaleur dans l'échantillon imagé, ce qui peut affecter la récupération au fil du temps.
Compteur de colonies automatisé / Dénombrement sans assistance par fluorescence
Le dénombrement sans assistance par fluorescence, ou comptage automatisé des colonies, est un dénombrement basé sur l'image qui n'utilise pas de colorants fluorescents. Certaines technologies utilisent l'analyse d'images basée sur des algorithmes pour prédire les colonies, tandis que d'autres nécessitent également un comptage manuel. Étant donné que ces instruments n'utilisent aucune fluorescence pour détecter les colonies à des stades très précoces de leur croissance, ou pour les distinguer du fond, il peut être difficile pour le système d'imagerie de distinguer les cellules individuelles des microcolonies.
- Technologies qualitatives
- Celsis Advance II™
- Celsis Accel®
- Celsis Adapt™
- Outils et ressources pour l'analyse de rentabilité
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Ressources de validation
- Présentation des services et de l'assistance à la validation Celsis (fiche technique)
- Celsis® Pour la stérilité : Validation d'un test de stérilité par inoculation directe sur 7 jours à l'aide du Celsis Advance
- Celsis® Pour la stérilité : Validation d'un test de stérilité par filtration sur membrane de 7 jours
- Résultats STAT pour les échantillons STAT : Mise en œuvre de méthodes modernes de micro-analyse rapide
- Aperçu de l'étude de cas : Comment obtenir l'autorisation réglementaire pour un test de stérilité rapide
- Ressources réglementaires
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Études de cas et témoignages
- Test rapide par bioluminescence ATP pour les produits non stériles : Feuille de route pour l'implémentation (webinaire)
- Le déploiement mondial de Celsis AMPiScreen® par Unilever apporte des avantages attendus et inattendus (étude de cas)
- Le parcours de la mise en œuvre d'un test de stérilité rapide : Résumé des efforts de collaboration entre Charles River et Roche Diagnostics
- Bâtir des bases solides pour la « Maison de la stérilité rapide » d’AstraZeneca
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